《刺客信条》故事设定在欧洲中古黑暗的十字军东征时期，游戏舞台穿梭于大马士革、耶路撒冷等中东历史名城之间，当时的统治者以高压方式统治人民诛杀异己，百姓苦不堪言，玩家扮演的是一位身怀绝艺的白衣刺客Altair，以来无影去无踪的高超杀人技巧，专门刺杀残暴的统治阶层，而铲奸除恶也成为玩家信守的“刺客信条”，为救无辜百姓而努力。

《刺客信条》也延续着《波斯王子》系列的一切优点，主角不但是个身手敏捷的武林高手，而且飞檐走壁擅长各种暗杀术，加上游戏舞台呈现的中世纪欧洲城镇风格，更能让玩家体验当个白衣刺客的神勇。而除了进行暗杀任务外，玩家也必须在街上收集情报，或接受任务委托，而游戏画面所营造的中古欧洲陈旧的怀旧感，以及熙来攘往的人声鼎沸，真的有不错的视觉效果。
该作是以12世纪十字军东征为舞台，并收录了包含回教异端教派阿萨辛派大本营“马西亚夫”、叙利亚回教文化中心“大马士革”、圣地“耶路撒冷”以及英国狮心王理查所统治的军事都市“阿克里城”等四个城镇要塞，为了重现12世纪时这四个都市当时风貌，游戏制作小组花了大量时间收集史料，以信望让游戏的场景更符合史实。

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